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當(dāng)前位置:生物測(cè)試 ? 蛋白實(shí)驗(yàn) ?
免疫共沉淀
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗原抗體之間的專(zhuān)一性作用為基礎(chǔ)用于確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。當(dāng)細(xì)胞在非變形條件下被裂解時(shí),完整細(xì)胞內(nèi)存在許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來(lái)。如果用預(yù)先固化在agarose beads上的蛋白質(zhì)A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來(lái),再通過(guò)蛋白質(zhì)變性分離,對(duì)B蛋白進(jìn)行檢測(cè),以證實(shí)兩者存在相互作用。這種方法常用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合,也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。
1. IP級(jí)別的抗體;需要研究的蛋白互作信息(蛋白名稱(chēng)、大小、種屬等)
2.實(shí)驗(yàn)樣本:組織樣品>200mg,細(xì)胞樣品>2 x 107 ,蛋白樣品大于2ml;
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