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免疫染色技術(shù)的主要分類和原理

來源：時(shí)間：2022-12-27 10:36:28 瀏覽：2299次

廣義的免疫染色包括免疫組織化學(xué)(Immunocytochemistry, IHC) 、免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry, ICC) 、免疫熒光 (Immunofluorescence, IF)，流式細(xì)胞儀分析(Flow cytometry)，免疫印跡(immunoblot, IB)即Western印跡(Western blot, WB)，酶聯(lián)免疫反應(yīng)(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和免疫電鏡(Immuno-electron microscopy, IEM)等。免疫染色(immunostaining)，包括任何基于抗原與抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)基本原理，檢測(cè)蛋白等目的分子的技術(shù)方法。狹義的免疫染色其檢測(cè)樣品僅限于保持原有形態(tài)的細(xì)胞或組織，通常包括免疫組化、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光、流式細(xì)胞儀分析和免疫電鏡，而不包括免疫印跡和酶聯(lián)免疫反應(yīng)。

染色原理：
用酶標(biāo)記的特異性抗體/抗原直接與樣本中相應(yīng)的抗原/抗體反應(yīng)結(jié)合，再與酶的底物作用產(chǎn)生有色產(chǎn)物，沉積在抗原-抗體反應(yīng)部位，即可對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定性、定位及定量研究。

免疫組織化學(xué)(Immunocytochemistry, IHC) ，即免疫組化，是應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)基本原理，最終通過化學(xué)反應(yīng)顯色來檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)抗原，對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究方法。狹義的免疫組化，其檢測(cè)的樣品僅限于組織切片或者培養(yǎng)的組織，而廣義的免疫組化其檢測(cè)的樣品也可以是培養(yǎng)的細(xì)胞。

免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry, ICC)，狹義的免疫細(xì)胞化學(xué)，檢測(cè)對(duì)象是培養(yǎng)的細(xì)胞；而廣義的免疫細(xì)胞化學(xué)，其檢測(cè)對(duì)象可以是培養(yǎng)的細(xì)胞，也可以是組織切片或者培養(yǎng)的細(xì)胞和組織。

免疫熒光(Immunofluorescence，IF)是一項(xiàng)建立在免疫學(xué)和熒光檢測(cè)技術(shù)基礎(chǔ)上的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，依據(jù)抗原、抗體的反應(yīng)原理進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位和半定量，是近代免疫學(xué)的一種重要研究手段。流式細(xì)胞儀分析(Flow cytometry)技術(shù)，也是一種免疫熒光檢測(cè)技術(shù)。

免疫組化和免疫熒光所含步驟大致相同，主要包括：樣本制備、抗原修復(fù)、背景封閉、抗體孵育、蛋白檢測(cè)等

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