双腿间已经湿成一片,亚洲啪啪综合AV一区,厨房的春潮A片,日本一道久久高清国产

<dfn id="p5utt"></dfn>

<del id="p5utt"></del>

快捷下單入口關(guān)于合作招聘新人手冊(cè) 會(huì)員中心

熱線：400-152-6858

測(cè)試狗科研服務(wù)

預(yù)存免費(fèi)試測(cè) 登錄

Document

當(dāng)前位置：文庫(kù)百科 ? 文章詳情

實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題有哪些？

來(lái)源：測(cè)試GO 時(shí)間：2022-10-28 11:34:10 瀏覽：3362次

在科研人員進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn)操作中遇到了不計(jì)其數(shù)的問(wèn)題，本文就給大家分享在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)頻率最高的一些問(wèn)題：

內(nèi)參基因COL1(擴(kuò)增曲線)

一、Ct值出現(xiàn)

檢測(cè)熒光信號(hào)的步驟有誤:一般SybrGreen法采用72℃延伸時(shí)采集，Taqman法則一般在退火結(jié)束時(shí)或延伸結(jié)束采集信號(hào)。

1、引物或探針降解:可通過(guò)PAGE電泳檢測(cè)其完整性。

2、模板量不足:對(duì)未知濃度的樣品應(yīng)從系列稀釋樣本的最高濃度做起。

3、模板降解:避免樣品制備中雜質(zhì)的引入及反復(fù)凍融的情況。

二、Ct值出現(xiàn)過(guò)晚（Ct>38）

1、擴(kuò)增效率低:反應(yīng)條件不夠優(yōu)化。設(shè)計(jì)更好的引物或探針；改用三步法進(jìn)行反應(yīng)；適當(dāng)降低退火溫度；增加鎂離子濃度等。

2、PCR各種反應(yīng)成分的降解或加樣量的不足。

3、PCR產(chǎn)物太長(zhǎng):一般采用80-150bp的產(chǎn)物長(zhǎng)度。

三、溶解曲線不止一個(gè)主峰

1、引物設(shè)計(jì)不夠優(yōu)化：應(yīng)避免引物二聚體和發(fā)夾結(jié)構(gòu)的出現(xiàn)。

2、引物濃度不佳：適當(dāng)降低引物的濃度，并注意上下游引物的濃度配比。

3、鎂離子濃度過(guò)高：適當(dāng)降低鎂離子濃度，或選擇更合適的mix試劑盒。

4、模板有基因組的污染：RNA提取過(guò)程中避免基因組DNA的引入，或通過(guò)引物設(shè)計(jì)避免非特異擴(kuò)增。

四、擴(kuò)增效率低

1、反應(yīng)試劑中部分成分特別是熒光染料降解。

2、反應(yīng)條件不夠優(yōu)化：可適當(dāng)降低退火溫度或改為三步擴(kuò)增法。

3、反應(yīng)體系中有PCR反應(yīng)抑制物：一般是加入模板時(shí)所引入，應(yīng)先把模板適度稀釋，再加入反應(yīng)體系中，減少抑制物的影響。

測(cè)試狗文庫(kù)百科

上一篇：專業(yè)干貨丨頭大？最煩人的『專利技術(shù)交底書(shū)』要點(diǎn)給你梳理好了！

下一篇：實(shí)時(shí)熒光定量 PCR檢測(cè)技術(shù)在生物學(xué)的用途

相關(guān)文章

一文詳解掃描電子顯微鏡(SEM)的工作原理及應(yīng)用技術(shù)

2023-10-08

接觸角測(cè)試（CA）的原理、樣品制備要求及實(shí)際應(yīng)用

2023-11-16

恒電流間歇滴定法GITT的基本原理以及測(cè)試教程

2022-08-12

TMA技術(shù)的基本概念、應(yīng)用領(lǐng)域以及實(shí)際操作中的要點(diǎn)

2023-12-06

詳解XRD多晶與單晶材料的差異

2023-12-21

熱重分析（TG-DTG）曲線的幾種解析方法

2023-12-26

熱門(mén)文章/popular

【科研干貨】電化學(xué)表征：循環(huán)伏安法詳解（上）

晶體結(jié)構(gòu)可視化軟件 VESTA使用教程（下篇）

手把手教你用ChemDraw 畫(huà)化學(xué)結(jié)構(gòu)式：基礎(chǔ)篇

電化學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)之電化學(xué)工作站篇（二）三電極和兩電極體系的搭建和測(cè)試

【科研干貨】電化學(xué)表征：循環(huán)伏安法詳解（下）

基礎(chǔ)理論丨一文了解XPS（概念、定性定量分析、分析方法、譜線結(jié)構(gòu)）

微信掃碼分享文章

意見(jiàn)反饋

有獎(jiǎng)舉報(bào)

商務(wù)合作

...

更多

公眾號(hào)

關(guān)注我們了解更多

小程序

隨時(shí)預(yù)約掌握進(jìn)度

舉報(bào)有獎(jiǎng)

TEL: 191-3608-6524

如：在網(wǎng)絡(luò)上惡意使用“測(cè)試狗”等相關(guān)關(guān)鍵詞誤導(dǎo)用戶點(diǎn)擊、惡意盜用測(cè)試狗商標(biāo)、冒稱官方工作人員等情形，請(qǐng)您向我們舉報(bào)，經(jīng)查實(shí)后，我們將給予您獎(jiǎng)勵(lì)。

舉報(bào)內(nèi)容：

200

上傳附件：

文件格式不正確，請(qǐng)重新上傳文件格式不正確，請(qǐng)重新上傳文件格式不正確，請(qǐng)重新上傳

文件格式：jpg、jpeg、png、gif、tif、doc、docx、ppt、pptx、xls、xlsx、pdf、zip、rar

聯(lián)系方式

姓名

電話

提交意見(jiàn)

意見(jiàn)反饋

Suggestions

您可以在此留下您寶貴的意見(jiàn)，您的意見(jiàn)或問(wèn)題反饋將會(huì)成為我們不斷改進(jìn)的動(dòng)力。

意見(jiàn)類型

測(cè)試服務(wù)

網(wǎng)站功能

財(cái)務(wù)報(bào)賬

其他類型

意見(jiàn)內(nèi)容

200

聯(lián)系方式

姓名

電話

提交意見(jiàn)

收起

01

專屬信用額度，先測(cè)后付0元下單

02

下單享高額積分，萬(wàn)千好禮免費(fèi)兌

￥200

200元無(wú)門(mén)檻優(yōu)惠券

立即激活立即下單

已使用

已作廢

了解更多會(huì)員權(quán)益

全流程在線可視化，便捷高效觸手可及

如下單過(guò)程中有任何疑問(wèn)或需要幫助，請(qǐng)隨時(shí)咨詢專屬顧問(wèn)~

9折

9折無(wú)門(mén)檻優(yōu)惠券

支付一筆訂單后可領(lǐng)取

立即領(lǐng)取立即下單

已使用

已作廢

免費(fèi)測(cè)+驚喜盲盒+高額福利，多重福利大放送

新人免費(fèi)測(cè)

雙雙開(kāi)盲盒（100%中獎(jiǎng)）

邀請(qǐng)人專享

受邀人專享

立即邀請(qǐng)

創(chuàng)建/加入團(tuán)隊(duì)，解鎖定制化權(quán)益

01

1500元團(tuán)隊(duì)專屬優(yōu)惠券

02

萬(wàn)元大額信用額度，享先測(cè)后付

03

團(tuán)隊(duì)成員統(tǒng)一開(kāi)票報(bào)銷(xiāo)；

04

專業(yè)工程師課題專屬服務(wù)

領(lǐng)取成功，請(qǐng)下單

請(qǐng)您支付一筆訂單后才可以領(lǐng)取優(yōu)惠券

Document 彝良县| 龙山县| 清徐县| 连州市| 宜兰县| 汽车| 上栗县| 克什克腾旗| 红原县| 西盟| 普定县| 德钦县| 闽侯县| 长泰县| 都匀市| 南汇区| 阿合奇县| 修水县| 六枝特区| 娱乐| 江阴市| 瑞金市| 绩溪县| 象山县| 无锡市| 邳州市| 固阳县| 板桥市| 会东县| 东丽区| 通江县| 神农架林区| 南宫市| 忻城县| 寿光市| 巴彦县| 安西县| 邹城市| 屏东市| 济阳县| 甘泉县|

<th id="p42rp"></th>