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測(cè)試狗科研服務(wù)

項(xiàng)目介紹

細(xì)胞培養(yǎng)是將組織從機(jī)體中取出離散成單個(gè)細(xì)胞(常用胰蛋白酶)，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖(注意整個(gè)過程無(wú)菌)。常見細(xì)胞培養(yǎng)為貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)。

服務(wù)流程

交付內(nèi)容

后續(xù)實(shí)驗(yàn)所需細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞照片以及實(shí)驗(yàn)報(bào)告

樣品要求

凍存細(xì)胞株請(qǐng)使用干冰郵寄，詳細(xì)的細(xì)胞培養(yǎng)信息以及送樣要求，請(qǐng)與技術(shù)顧問溝通確認(rèn)。

項(xiàng)目案列

常見問題

細(xì)胞凍存液DMSO作用

DMSO屬于一種可滲透到細(xì)胞內(nèi)的冷凍保護(hù)劑。在細(xì)胞冷凍懸液完全凝固之前，DMSO滲透到細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度，降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，從而保護(hù)細(xì)胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷，同時(shí)，細(xì)胞內(nèi)水分也不會(huì)過分外滲，避免了細(xì)胞過分脫水皺縮。DMSO在常溫下對(duì)細(xì)胞的毒性作用較大，而在4°C時(shí)，其毒性作用大大減弱，且能以較快的速度滲透到細(xì)胞內(nèi)。所以，凍存時(shí)需要徹底預(yù)冷凍存液，放置在4°C需要至少30分鐘的時(shí)間。最簡(jiǎn)便的方法是將凍存液一直放在4°C冰箱中，隨用隨取，用完放回冰箱。

為什么細(xì)胞長(zhǎng)得慢

可能是細(xì)胞接種得太少，細(xì)胞密度太低。可以先培養(yǎng)，然后消化重新鋪瓶，提高密度培養(yǎng)。

如何判定細(xì)胞是否發(fā)生支原體污染？

可以選用直接培養(yǎng)法、熒光染色或PCR方法檢測(cè)，比較常用的是PCR。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生支原體污染時(shí)，原則上是能夠去除支原體的，但是整個(gè)過程耗時(shí)耗力，還要考驗(yàn)個(gè)人操作能力。所以如果不是處于細(xì)胞存量很少的情況下，建議發(fā)現(xiàn)污染時(shí)立刻棄掉，重新培養(yǎng)。

為什么會(huì)出現(xiàn)空泡

可能是鋪板時(shí)鋪得不夠均勻，局部過于密集，密集地方的細(xì)胞就開始狀態(tài)變差、空泡增多。也可能是血清差，需要更換優(yōu)質(zhì)血清，及時(shí)換液。

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